hat培养基筛选杂交瘤细胞的原理（hat培养基）

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1、HAT选择培养基的作用是筛选出含有次黄嘌呤-鸟嘌呤核苷磷酸核糖基转移酶（HGPRT）或胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的细胞。

2、HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的。

3、缺失这两种酶的细胞，在HAT培养基中，应该不能生存，只有发生融合或者其他情况下，才能是细胞重新获得用旁路途径进行DNA合成能力。

4、扩展资料HAT选择法即胸苷激酶基因选择法，胸苷激酶（Thymidine Kinase，简称TK）能催化胸苷（T）转变成dTMP，进而生成dTTP。

5、TK选择系统将含有tk+基因的表达载体导入tk-宿主细胞，再用含有次黄嘌呤（H），氨基喋呤（A）和胸苷（T）的培养基培养细胞，其中A为叶酸类似物，可阻断dATP,dGTP的合成，及dUMP到dTTP的转化，但H可合成IMP，再由IMP合成dATP和dGTP，含有载体的tk+细胞能利用T合成dTTP，故可合成DNA使细胞存活，不含载体的tk-细胞不能利用T合成dTTP，无法合成DNA使细胞死亡。

6、该系统中的tk+基因能报告载体的导入，称报告基因，培养基中含有H,A和T,故将这种选择方法称做HAT选择法。

7、参考资料来源：百度百科-HAT培养液参考资料来源：百度百科-hat培养基参考资料来源：百度百科-HAT选择法。

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